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ME-Calcium甘露醇糖類(lèi)檢測專(zhuān)用柱

發(fā)布時(shí)間: 2018-09-17 10:28   8987 次瀏覽



ME-Calcium系列色譜柱專(zhuān)為高效分離制備水溶性或部分水溶性的有機化合物而設計,可用于分離糖類(lèi)、有機酸、多肽和細胞代謝物中的生物有機小分子。ME-Calcium系列固定相是在低交聯(lián)度(5%、8%和10%)的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)顆粒(5、10 μm)表面鍵合磺酸基團(-SO3H),即為ME-Calcium填料;若在此填料上繼續絡(luò )合不同的離子則形成不同類(lèi)型的填料。如絡(luò )合離子為鈣離子(Ca2+),則為ME-Calcium填料;如絡(luò )合離子為鉛離子(Pb2+),則為ME-Calcium Pb填料;如絡(luò )合離子為鉀離子(K+),則為ME-Calcium 填料;如絡(luò )合離子為鈉離子(Na+),則為ME-CalciumN填料。

                                                 

5和10 μm ME-Calcium填料電鏡圖



ME-Calcium色譜柱技術(shù)參數表


 


類(lèi)型

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

基質(zhì)

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

粒徑 (μm)

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

交聯(lián)度

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

固定相

-SO3H

-(SO3)2Ca

-(SO3)2Pb

-SO3K

-SO3Na

pH穩定性

1 – 3

5 – 9

5 – 9

5 – 9

5 – 9

******耐壓 
(psi) (1)

10% 交聯(lián)度

10 μm

1,500

1,500

1,500

1,500

1,500

5 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

8% 交聯(lián)度

10 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

5 μm

800

800

800

800

800

5% 交聯(lián)度

10 μm

600

600

600

600

600

5 μm

400

400

400

400

400

推薦流動(dòng)相

2.5 mM H2SO4
0.1% H3PO4

H2O

H2O

H2O

H2O

推薦流速
(mL/min)(2)

7.8x300 mm

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

4.6x300 mm

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

******耐受溫度 (oC)

85

85

85

85

85


(1) 對于7.8x300 mm柱在******溫度下而言,并扣除儀器的背壓。
(2)
對于固定相為5 μm5%交聯(lián)度樹(shù)脂、規格為7.8x300 mm柱的流速是0.1 to 0.15 mL/min。



ME-Calcium甘露醇糖類(lèi)檢測專(zhuān)用柱特點(diǎn):

● 均勻一致的粒徑確保了高分辨率和分離的高效性


● 交聯(lián)度:5%、8%和10%


● 與絕大多數水系流動(dòng)相容(包括純水)


● 離子形態(tài)選擇范圍寬:H+、Ca2+、Pb2+、K+和Na+


● ME-Calcium柱的pH適用范圍為1~3,其他類(lèi)型ME-Calcium柱的pH適用范圍為5~9


● 包括分析柱和制備柱


均一的粒徑


 


    ME-Calcium 固定相粒徑分布極窄,5 μm5.0±0.2 μm,10 μm10.0 ± 0.2 μm。如此均一的粒徑分布確保了賽分產(chǎn)品具有高的分離效率和回收率。圖1表明,分離單糖試驗中,ME-Calcium 色譜柱比其他品牌產(chǎn)品具有更高的分離效率。


 


1. 相同分離條件下,在ME-Calcium (5 μm, 8%交聯(lián)度, 7.8 x 300 mm)柱和其它品牌相同規格鈣柱上分離6種單糖效果對比。 


 


17.jpg

流動(dòng)相:     H2O
流速:         0.60 mL/min
溫度:         85
進(jìn)樣量:     20 μL
檢測:         RI

 


 


不同離子態(tài)


 


    ME-Calcium樹(shù)脂多種可選離子態(tài)使得賽分ME-Calcium系列柱可廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的******分離。例如,樹(shù)膠醛糖、核糖醇、阿糖醇很難在H柱上分離,卻能在Ca柱上實(shí)現******分離;木糖、半乳糖和甘露糖在Ca柱上是一個(gè)重疊峰,而在Pb柱上則能夠依次單獨流出。


 


不同離子態(tài)的選擇


離子

應用

H

發(fā)酵產(chǎn)物、含有機酸的果汁、醇類(lèi)和糖類(lèi)

Ca

含大量果糖的玉米糖漿中的糖類(lèi)、尤其適用于單糖、二聚糖、三聚糖、四糖及糖醇的分離

Pb

木制品中的戊糖和己糖
含有蔗糖、乳糖等的奶制品

K

蔗糖、蜜糖、玉米糖漿、甜菜糖及其他含有糖類(lèi)植物產(chǎn)品(含有甜菜堿、******基氯化銨等兩性離子的)
甘草膦

Na

低聚糖,尤其在含有大量無(wú)機鈉離子的情況下,如蜂蜜。


 


低交聯(lián)度


 


    ME-Calcium樹(shù)脂的低交聯(lián)度使其在流動(dòng)相中可以適當的溶脹,尤其在高溫條件下這是實(shí)現大多數分離任務(wù)的典型模式。這種溶脹可以?xún)?yōu)化分離時(shí)的比表面積、滲透性、容量、選擇性,及改變離子強度。PS/DVB粒子的交聯(lián)度越低,樹(shù)脂結構***越開(kāi)放,從而使更大分子量的多聚糖也有良好滲透性。圖2表明,在5% ME-Calcium 柱上,聚己糖(G6)可以很好的從基質(zhì)中分離,并且還能看到聚庚糖(G7)和聚辛糖(G8)的兩個(gè)峰得到了分離;而在8% ME-Calcium上不但沒(méi)有G7G8的峰,連G6的峰都不太明顯。


 


2. 不同交聯(lián)度ME-Calcium (5 μm, 7.8 x 300 mm)柱上麥芽糊精和甘油的流出曲線(xiàn)


 


色譜柱:      ME-Calcium Ca-NP5
流動(dòng)相:      H2O
流速:          0.20 mL/min
溫度:          85
進(jìn)樣量:      20 μL 
檢測波長(cháng):   192 nm
樣品:       Glucidex (100 mg/mL) and glycerol (10 mg/mL) (G3 to G7 refer to oligosaccharides)
 

 

car22.jpg


 


******的穩定性


 


    ME-Calcium HPLC柱優(yōu)良的制造工藝和******的填裝技術(shù)******了其具有高的穩定性。即使是在升高溫度的條件下,ME-Calcium樹(shù)脂也能在純水和其他水緩沖體系中保持穩定。圖3表明,55下,6天內連續沖洗578倍柱體積,酸的保留時(shí)間僅改變了1%。


 


3. ME-Calcium  (5 μm, 8%交聯(lián)度)55下連續用5 mM H2SO4沖洗后分離有機酸色譜圖


20.jpg


 

色譜柱:    4.6x 250 mm 
流動(dòng)相:    5 mM H2SO4
流速:        0.30 mL/min    
溫度:        55
進(jìn)樣量:     20 μL        
檢測:         RI
樣品:         1, Citric acid (50 mM); 2, Acetic acid (100 mM)

 

 


 


穩定的批間重現性


 


    由于采用了可控的表面化學(xué)修飾技術(shù)并嚴格監控聚合物樹(shù)脂的生產(chǎn)過(guò)程,ME-Calcium柱具有很高的批間重現性。圖4表明,不同批次間的保留時(shí)間誤差在0.3%以?xún)取?/span>


 


4. 三個(gè)不同批次ME-Calcium (10 μm, 8%交聯(lián)度)柱分離有機酸色譜圖


20.jpg


 

色譜柱:   7.8x300 mm         
流動(dòng)相:   2.5 mM H2SO4 
流速:       0.6 mL/min           
溫度:       55
進(jìn)樣量:    5 μL                
檢測:        RI
樣品:        Mixture of Citric acid, Succunic acid, Formic acid, Acetic acid


 


 
多種分離機理共同作用


 


    ME-Calcium樹(shù)脂表面的抗衡離子(H+,Ca2+,Pb2+,K+Na+)能緩和分離過(guò)程。通常,分離的過(guò)程涉及兩種或兩種以上的機理同時(shí)作用,包括體積排阻、離子排斥、離子交換、配體交換、反相作用及正相作用。對多糖類(lèi)樣品來(lái)說(shuō),體積排阻機理是主要的作用機理,如圖4中寡聚糖的分離。而分離單糖時(shí)的主要機理則主要是配位效應,例如Ca型柱中分離葡萄糖的α、β-異構體。在實(shí)現蜂蜜樣品的分離過(guò)程中,首要的機理為離子排斥作用,該作用使得無(wú)機鈉離子通過(guò)孔隙被洗脫下來(lái)。而體積排阻和配體交換作用則依次作用于寡聚糖和單糖的分離。對于分離有機酸用的ME-Calcium H型樹(shù)脂來(lái)說(shuō),反相作用和離子排阻作用均為首要機理。疏水性和pKa同時(shí)影響樣品組成的保留時(shí)間。這一特性使得ME-Calcium型樹(shù)脂非常適合于監測發(fā)酵過(guò)程中成分的變化。


 


 


ME-Calcium



產(chǎn)品名稱(chēng)

粒度

交聯(lián)度

規格

訂貨號

ME-Calcium

10 μm

5%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 μm

5%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 μm

5%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 μm

5%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 μm

5%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 μm

5%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 μm

8%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 μm

8%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 μm

8%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 μm

8%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 μm

8%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 μm

8%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 μm

10%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 μm

10%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 μm

10%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 μm

10%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 μm

10%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 μm

10%

10x300 mm

511331-10030




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